甘肃南部双盾木属动物的ISSR阐发

  甘肃南部双盾木属动物的ISSR阐发_生物学_天然科学_专业材料。采用ISSR手艺阐发了甘肃南部门布的4种双盾木的遗传多样性和遗传分化.按照研究成果,指出4种双盾木属总的多态位点百分率(PPB)很高,达100%。其遗传多样性很丰硕,但正在种间的分布是不服均的,成果取Nei’s基因多样度和Shahnon消息指数的遗传多样性阐发成果分歧,按照非加全算术平均聚类法以及ISSR特征图谱能够将分歧种区分隔来,得出ISSR标识表记标帜可很好地用于双盾木属的鉴

  维普资讯 科技谍报开辟取经济 文 章 编 号 :05 6 3 (0 8 1— 17 0 10 —0 3 20 )4 0 2 —4 S IT C F R T O E E O ME T& E O O Y C — E H I O MA I N D V L P N N CNM 20 年 第 l 卷 08 8 第 l 期 4 收稿 日期 :0 80 — 4 2 0 — 3 2 甘肃 南部双盾木属植 物 的 IS S R阐发 任 冬 子 , 占林 刘 ( 西北大学生命科学 院 , 陕西西 安 ,10 9 706 ) 摘 要: 采用 IS S R技 术阐发 了甘肃南部门布的 4种双盾木的遗传 多样性 和遗传分化 。 根 据研 究 结 果 , 出 4种双 盾 木 属 总 的 多 态位 点 百 分 率 (P ) 高 , 10 , 遗 传 多 指 P B很 达 0% 其 样 性很 丰 富 , 正在 种 间 的分 布 是 不均 匀的 , 果 取 N is 因 多样 度 和 S an n信 息 指 但 结 e’ 基 hno 数 的 遗 传 多样 性 分 析 结 果 一 致 ,根 据 非加 全 算术 平 均 聚 类 法 以及 1S S R特 征 图谱 可 以 将 不 同种 区分隔来 ,得 出 IS S R标识表记标帜 可很 好地用于双盾木属的鉴 定和 遗传背 景研 究 的 结论 。 环节词 : 双盾木属 ; S I R标识表记标帜 ; S 遗传 多样性 ; 聚类阐发 中 图分 类号 : 94 Q 4 文 献 标 识 码 : A 双盾 木属 ( ph ) Die a附属 于忍冬科 , 是我国古特有属 , 下有 4个种 : 属 双 盾 术 ( .oiu d ) 优 美 双 盾 木 ( .l as , 云 南 双 盾 木 ( Df r n a 、 l b Dee n ) g D v n ae s ) 文 县 双 盾 木 ( exa es ) 双 盾 木 属 是 北 温 带 植 物 区 u nn ni 和 s Dw ninni 。 s 表 1 材 料 及 采 样 地 点 编号 采样地域 海拔, m 个别数 系中的陈旧 、 孑遗的木本属之一。 分布区从 西南一曲延长到华 中。 其 该属 正在 陇南 地 区均有分布 ,此中漂亮双盾 木和文县双 盾木是该地 区的特 有 种, 也是珍稀濒危。 然而对双盾木属动物 D A水 平上遗传 多样性及 N 居群闾遗传变异分化的关系从未进行研究 , 因而操纵遗传学 的方 法 l 2 3 4 甘肃碧 口 峰沟 碧 甘肃铁楼寨 科桥峰岩 沟 甘肃寨柯桥 陕 西 佛 坪 90 l 0 0 ~ 0 2 22 0 0 l 0 0 6 22 0 0 2 9 l 5 l 2 5 探 求该地 区双盾木属动物的遗传多样性 , 双盾木属动物的系统演化 关 系, 对我国特有的种质资本有着主要 的理论 取使用价值 。 简单反复序 列间隔 区( t — i p eun e ee t I R) 19 I e S l Sq ec p a , S 是 9 4 nr m e R sS 年 由 大学 Zeke i itiwe z等成长起来 的一 种基于微卫 星序 列的十分无效的标识表记标帜。S R标识表记标帜具有操做简单 、 IS 成本低 、 快速灵 敏、 多态性高 、 需 D A量 少及无需晓得研 究对象 的基因序列 、 所 N 反复性 5 6 甘肃舟曲县哈儿沟 甘肃宕昌县甘江乡 2l0 0 24 0 0 5 5 本研究采用改 良的 2 C A x T B法( 王关林等 ,9 8 。称取 8 m 经硅 19 ) O g 胶干燥后的样品置于研钵 中, 加人适量 P P0 、 V _ T 抗坏血 酸、 石英砂 , 正在 液氮中敏捷研磨至粉状 ,然后加人到 80 预热的 6 的 2 C A 提 0L 5c x T B 取液 中 , 并正在 6 5℃水 浴下温 浴 6 i , 0m n 期间 不竭混 匀 , 使其抽 提完 好等长处 , 普遍使用于遗传学 等方面的研究 。 本研究采用 IS S R 标识表记标帜来研究双盾木属的遗传变异 , 以阐明双盾 木属植 物遗传多样性程度 和遗传布局 , 双盾木属动物的系统演化关系 。 全;n J 入等体积(0 i ) J 80x 的氯仿—异戊醇 ( L 体积比 2 : , 4) 1 混匀 , 0 0 g 1 0 ̄ 2 离心 1 mn取上 清液转入另一 1 m 离心管 中, 80 氯仿一 异戊 0 i, . L 5 用 0 醇反复抽 提 2 3次 , 出上清液 , — 取 插手 23体积 的一 O℃异丙 醇 , 匀后 / 2 混 置于一 O℃、0mi 2 3 n以上 ,000 g离心 1 i 10 x 0mn,弃 上清液 ,风干沉 淀用 1 材 料和 方式 11 材 料 . 8 0 %冷 乙醇溶液洗 涤沉淀两次 , 0 g 0 L7 0 1 O x 离心 5 i,风干沉淀 ; 00 n m 插手 2 T O E缓 冲液 溶 解 DN A。08 .%琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 检 测 D A质 量 , N 紫外分光光度计测定 的吸光度 A 6 2 0和 A 8 ,计较其 质量浓度 和纯度 。 20 尝试材料 采集于 2 0 - 2 0 年 ,按照双盾 木属 4 05 07 个种 的居群大小 随机采样 。 于小的居群一般全采 , 对 大的居 群按 比例采集 。 采样 时采摘 双 盾 木的新颖叶片 , 敏捷置于盛有硅胶 的塑封袋